新生兒缺氧缺血性腦損傷（HIBD）是導致兒童神經功能障礙的重要病因，其中神經元鐵死亡（ferroptosis）被認為是核心病理機制之一。鐵死亡是一種鐵依賴的脂質過氧化驅動的細胞死亡形式，在缺血再灌注（I/R）損傷中尤為突出。盡管M2型小膠質細胞（M2型微glia）的抗炎和神經保護作用已被廣泛研究，但其分泌的外泌體（exosomes）如何調控神經元鐵死亡仍不清楚。南京醫科大學附屬淮安第一醫院的研究團隊在《Scientific Reports》發表的研究中，首次揭示了M2-exos通過AMPK/ULK1/FUNDC1軸激活線粒體自噬，從而抑制神經元鐵死亡的分子機制。

研究采用HT-22神經元細胞構建氧糖剝奪/復氧（OGD/R）模型模擬I/R損傷，通過超速離心法分離M2-exos，結合透射電鏡、納米顆粒追蹤分析和Western blot驗證外泌體特性。關鍵實驗技術包括CCK-8檢測細胞活力、MDA/GSH/鐵含量測定、免疫熒光觀察線粒體自噬標志物LC3B-II的定位，以及Western blot分析AMPK/ULK1/FUNDC1信號通路蛋白表達。

M2型BV-2細胞通過分泌外泌體減輕OGD/R誘導的HT-22細胞鐵死亡
IL-4誘導的M2型BV-2細胞條件培養基（CM）顯著提升OGD/R暴露下HT-22細胞的存活率，降低MDA和鐵含量，上調GPX4和SLC7A11表達。外泌體抑制劑GW4869可逆轉這些效應，證實M2-exos是關鍵保護因子。

M2-exos的分離與鑒定
透射電鏡顯示直徑約70 nm的典型外泌體結構，Western blot檢測到TSG101和CD63陽性標記，排除細胞污染標志物GM130和Calnexin。

M2-exos通過增強線粒體自噬抑制鐵死亡
M2-exos處理增加線粒體與LC3B-II的共定位，降低線粒體蛋白TOMM20/TIMM23水平。使用線粒體自噬抑制劑Mdivi-1或3-MA后，M2-exos的保護作用被顯著抵消，證實線粒體自噬是其關鍵機制。

AMPK/ULK1/FUNDC1通路介導M2-exos的效應
OGD/R抑制AMPK/ULK1/FUNDC1磷酸化，而M2-exos可逆轉此現象。AMPK抑制劑dorsomorphin或ULK1抑制劑SBI-0206965均能阻斷M2-exos對線粒體自噬和鐵死亡的調控作用。

研究結論表明，M2-exos通過AMPK/ULK1信號激活FUNDC1依賴的線粒體自噬，清除受損線粒體并抑制脂質過氧化，最終緩解神經元鐵死亡。這一發現不僅闡明了外泌體在神經保護中的新機制，還為開發靶向線粒體自噬的HIBD治療策略提供了理論依據。討論部分指出，未來需進一步鑒定M2-exos中具體的功能性分子（如circRNA），并在動物模型中驗證其長期療效。盡管研究受限于體外模型和急性期觀察，但其揭示了外泌體-線粒體自噬-鐵死亡軸在神經系統疾病中的普適性意義，為缺血性損傷的干預開辟了新方向。