突觸核蛋白病是一類以α-突觸核蛋白（α-syn）異常聚集為特征的神經退行性疾病，包括帕金森�。≒D）、路易體癡呆（DLB）和多系統萎縮（MSA）。這些疾病的共同病理特征是α-syn在神經元或膠質細胞中形成路易小體（LBs）或膠質細胞包涵體（GCIs）。近年研究發現，α-syn病理蛋白可像朊病毒一樣在腦內播散，但現有臨床抗體療法如prasinezumab和cinpanemab的療效有限，亟需開發更具靶向性的治療策略。

為突破這一瓶頸，H. Lundbeck A/S與Genmab BV的研究團隊聯合開發了人源化單克隆抗體Amlenetug（Lu AF82422），并通過多維度實驗驗證其治療潛力。研究首先利用HuMAb轉基因小鼠免疫篩選獲得靶向α-syn C端（112-117表位）的抗體，隨后采用X射線晶體學解析抗體-抗原復合物結構（PDB ID: 8B9V），結合自由能擾動計算（FEP）明確關鍵結合殘基（I112-L113/D115-M116）。功能實驗顯示，Lu AF82422能劑量依賴性地抑制PFFs、Fibrils等多種α-syn纖維組裝體及MSA患者腦提取物誘導的原代神經元病理播散（IC₅₀ 0.3 nM），其機制主要通過阻斷種子內吞（減少80% uptake）和抑制C端截短片段（1-119）積累。在體實驗中，抗體共注射或外周給藥（100 mg/kg）均可顯著減少小鼠紋狀體注射模型的黑質和運動皮層pS129-α-syn陽性細胞（p<0.05）。與臨床抗體對比發現，Lu AF82422對截短α-syn種子的抑制效果優于prasinezumab（EC₅₀ 0.01 nM vs 6 nM）。

關鍵技術方法包括：1）從MSA/PD患者腦組織（BioIVT來源）分離sarkosyl不溶性聚集體；2）基于原代F28轉基因神經元（過表達人α-syn）的種子擴增模型；3）均相時間分辨熒光（HTRF）定量病理聚集體；4）pHrodo標記PFFs的內吞追蹤；5）立體定位注射小鼠的病理傳播分析。

研究結果部分：

1. 抗體生成與表位鑒定：通過免疫肽陣列和晶體結構（2.1 ?分辨率）鎖定Lu AF82422結合表位于α-syn 112-117（ILEDMP），其重鏈CDR區與D115/M116形成關鍵疏水相互作用（ΔΔG>3 kcal/mol）。
2. 體外病理抑制：在F28神經元中，Lu AF82422可抑制P91（0.25 μg/ml）、Ribbons（0.6 μg/ml）等不同構象纖維的播種效應，并減少pHrodo-PFFs內吞（p<0.001）。
3. 體內療效驗證：外周給藥組（-2周預處理）使運動皮層病理減少50-60%（p<0.05），但延遲給藥（+1周）無效，提示需早期干預。
4. 臨床相關性：免疫沉淀-WB證實Lu AF82422可結合PD/DLB患者腦中的pS129-α-syn和CTTs，HTRF顯示其能清除>90% MSA腦提取物聚集體。

結論與意義：該研究首次闡明靶向α-syn 112-117表位的抗體可通過"雙管齊下"機制——既阻斷病理種子播散又抑制毒性片段積累，為突觸核蛋白病提供差異化治療策略。晶體結構指導的理性設計提升了抗體對多構象聚集體（含MSA特異性株）的廣譜結合力，而臨床前數據支持的CSF暴露量（0.16-0.51%）為其進入II期臨床試驗（NCT05104476）奠定基礎。盡管該抗體對已形成的病理無效，但為疾病修飾療法開發提供了重要范式：即針對不同α-syn蛋白水解片段（如1-119/1-122）設計抗體，可能更有效阻斷病理級聯反應。