腦出血(ICH)作為致死率最高的卒中類型，其治療手段至今仍十分有限。當血液突然涌入腦實質，不僅會造成機械性損傷，隨之而來的神經炎癥和細胞死亡更是導致預后不良的元兇。近年來，一種新型程序性細胞死亡方式——銅死亡(cuproptosis)引起了科學家們的注意。這種由銅離子異常積累觸發的死亡模式，與三羧酸循環(TCA)中脂�；�蛋白的異常堆積密切相關。有趣的是，銅死亡已在骨關節炎和糖尿病腎病等疾病中被證實與氧化應激相關，但它在ICH中的角色仍是一片空白。

蘇州大學第一附屬醫院神經外科團隊通過整合GSE228222和GSE200575小鼠ICH模型數據，結合GSE24265人源樣本驗證，首次揭示了銅死亡相關基因在ICH中的調控網絡。研究人員采用Combat算法消除批次效應，通過limma包篩選差異表達基因(DEGs)，并與已知12個銅死亡相關基因(CRGs)取交集，最終鎖定7個關鍵CuDEGs。免疫浸潤分析采用CIBERSORT和ssGSEA算法，實驗驗證則通過qRT-PCR和免疫組化(IHC)完成。

GEO數據合并與DEGs鑒定
整合6個ICH和6個對照樣本后，共識別8,254個DEGs，其中Gls等7個基因與銅死亡顯著相關。熱圖顯示這些基因在ICH中普遍下調。

功能富集分析
GO分析顯示DEGs富集于自噬和突觸功能，KEGG通路則集中在MAPK和P53信號。引人注目的是，CuDEGs特異性關聯丙酮酸代謝和檸檬酸循環——這正是銅死亡的核心代謝路徑。

免疫細胞浸潤評估
CIBERSORT揭示ICH樣本中M0/M1巨噬細胞和初始CD8⁺ T細胞增加，而靜息NK細胞和CD4⁺ T細胞減少�；�因-免疫相關性分析發現Gls與CD4⁺ T細胞呈正相關，提示其可能通過CCL28等趨化因子調控淋巴細胞募集。

CuDEGs鑒定與驗證
在7個關鍵基因中，谷氨酰胺酶(Gls)表現尤為突出。作為谷氨酸合成的限速酶，其下調可能通過減少興奮性毒性發揮保護作用。qRT-PCR證實ICH小鼠腦組織中Gls表達顯著降低，人源樣本也呈現相同趨勢。免疫組化顯示Gls蛋白在出血周邊區域明顯減少。

該研究首次構建了ICH后銅死亡-免疫調控的分子網絡，提出Gls可能通過雙重機制改善預后：一方面減少谷氨酸介導的神經元興奮性毒性，另一方面調節CD4⁺ T細胞介導的炎癥反應。值得注意的是，Gls與趨化因子CCL26/CCL28的強相關性為理解神經-免疫對話提供了新視角。盡管臨床轉化仍需解決時空特異性調控等挑戰，但這項研究為開發靶向銅死亡的神經保護策略奠定了理論基礎。