臨界骨缺損修復一直是臨床面臨的重大挑戰，單純促進成骨猶如"單腿走路"——缺乏血管網絡的"營養通道"和神經支配的"調控系統"，再生的骨骼往往成為"無源之水"。傳統組織工程支架要么像"獨奏樂器"僅關注骨再生，要么如"短效藥物"無法維持生長因子的持續釋放。更棘手的是，血管和神經再生需要復雜的"細胞交響樂"，而現有技術難以模擬這種動態交互。北京口腔醫院的研究團隊在《Bioactive Materials》發表的突破性研究，猶如為這場再生醫學音樂會譜寫了全新樂章。

研究團隊采用3D生物打�。‵RESH技術）構建氧化藻酸鹽微纖維（aMF），結合磷酸鈣骨水泥（CPC）形成雙階段釋放支架；通過流式細胞術篩選hPDLSCs，與hUVECs和PCs按4:12:1比例共培養；利用Micro-CT、免疫熒光和RNA測序等技術評估再生效果；采用Western blot驗證TRIM26基因功能。實驗使用SD大鼠雙側顱骨缺損模型（5mm直徑），樣本量每組n=4。

3.1 支架設計與制備
創新性采用FRESH技術打印含7.5%氧化藻酸鹽的200μm微纖維，SEM顯示降解形成的100-300μm大孔道（圖2G），為細胞延伸提供空間。CPC的FTIR和原子力顯微鏡證實PO₄^3-結構（圖2H-I），力學測試顯示其抗彎強度（15MPa）優于松質骨（圖2J）。

3.2 雙階段釋放系統
CPC在1-4天快速釋放MET建立微環境（階段一），aMF在4-12天緩釋MET并釋放細胞（階段二）。HPLC檢測顯示兩階段MET釋放曲線完美銜接（圖2M），pH值穩定在7.2-7.4（圖2O），CCK-8證實三細胞存活率>90%（圖2N）。

3.3 三細胞協同效應
hPDLSCs（CD90⁺）與PECAM1⁺的hUVECs、Desmin⁺的PCs共培養時，形成密集的毛細血管樣結構（圖3F）。200mg/mL MET使ALP活性提升2倍（圖4E），最佳比例組（4:12:1）的礦化結節面積增加3.5倍（圖4G）。

3.5 體內骨再生
Micro-CT顯示實驗組（三細胞+MET）BV/TV值達45%，是對照組的2.5倍（圖5C）。Masson染色顯示成熟骨膠原纖維有序排列（圖5E），IL-1β表達降低60%（圖5G）。

3.6 血管神經再生
CD31⁺血管密度增加20倍（圖6B），CGRP⁺神經纖維與新生血管伴行（圖7A）。RNA測序發現TRIM26表達上調4.8倍（圖8H），Western blot證實其通過激活Runx2和MAPK促進再生（圖8J）。

這項研究開創性地將"時空控釋"與"多細胞交響"理念相結合。雙階段MET釋放猶如"精準灌溉系統"，先營造再生微環境，再輸送細胞"施工隊"；三細胞共培養則像"聯合施工團隊"，hPDLSCs作為"建筑師"分泌基質，hUVECs和PCs形成"輸水管網"。特別值得注意的是，TRIM26可能是調控"神經-血管-骨"三位一體再生的"總指揮"，這為理解組織再生提供了新視角。該技術未來在頜骨缺損修復中具有重要轉化價值，但需解決三細胞規�；�培養的成本問題。正如研究者所言："真正的再生不是簡單填補空缺，而是重建具有生命力的功能單元。"這項研究正是朝著這個目標邁出的關鍵一步。