帕金森病作為第二大神經退行性疾病，目前仍缺乏根治手段。近年來，GBA1（編碼溶酶體酶β-葡萄糖腦苷脂酶GCase）和LRRK2（富含亮氨酸重復序列激酶2）基因被證實是PD的關鍵遺傳風險因素，但二者間的分子對話機制尚不明確。更棘手的是，哥倫比亞人群特有的GBA1 K198E突變（第198位賴氨酸替換為谷氨酸）會導致GCase催化活性喪失，伴隨異常磷酸化的LRRK2（p-Ser⁹³⁵）和α-突觸核蛋白（p-Ser¹²⁹ α-Syn）堆積，但傳統GCase激活劑對此束手無策。來自哥倫比亞安蒂奧基亞大學神經科學研究組的Laura Patricia Pérez-Abshana 1 等人在《NeuroMolecular Medicine》發表的研究，首次揭示LRRK2激酶抑制劑PF-06447475（PF-475）能通過調控RAB10磷酸化逆轉這一惡性循環。

研究團隊采用皮膚成纖維細胞模型（來自58歲GBA1 K198E雜合突變PD患者和同齡健康對照），通過流式細胞術、熒光顯微成像等技術，系統評估了PF-475對GCase活性、溶酶體積累、線粒體功能等指標的影響。關鍵實驗包括：1）β-葡萄糖腦苷脂酶活性檢測；2）磷酸化蛋白（p-Ser⁹³⁵ LRRK2、p-Thr⁷³ RAB10等）流式定量；3）LysoTracker/MitoTracker標記的溶酶體和線粒體功能分析；4）氧化應激標志物DJ-1 Cys¹⁰⁶-SO₃和凋亡蛋白CC3檢測。

GBA1 K198E突變導致多重病理表型
研究發現突變細胞GCase活性降低3.76倍，但蛋白表達反而升高3.88倍，呈現典型的"酶活缺陷-代償性高表達"特征。更關鍵的是，突變細胞p-Ser⁹³⁵ LRRK2和p-Thr⁷³ RAB10分別激增733%和328%，證實LRRK2-RAB10通路異常激活。

PF-475展現多靶點保護作用
1μM PF-475處理24小時后，突變細胞的GCase活性恢復362%，效果遠超GCase激活劑GCA（+42%）。機制上，PF-475使p-Ser⁹³⁵ LRRK2降低67%，并同步下調p-Thr⁷³ RAB10（-72%），提示RAB10是LRRK2調控GCase的關鍵介質。

細胞器功能全面改善
該抑制劑使溶酶體積累減少53%（LysoTracker信號），線粒體膜電位（ΔΨm）提升15%，氧化應激標志物DJ-1 Cys¹⁰⁶-SO₃和凋亡執行蛋白CC3分別下降74%和61%。相比之下，GCase激活劑GCA僅改善溶酶體功能，對氧化應激和凋亡無顯著影響。

異常蛋白磷酸化被糾正
PF-475使病理性的p-Ser¹²⁹ α-Syn降低69%，而GCA和CBE（GCase抑制劑）對此無效，證明該效應是LRRK2抑制的特異性作用。

這項研究首次闡明LRRK2-RAB10-GCase軸在PD發病中的核心地位：GBA1 K198E突變→GCase活性喪失→溶酶體-線粒體對話障礙→氧化應激激活LRRK2→RAB10過度磷酸化→α-Syn病理堆積，形成惡性循環。PF-475通過打斷這一循環的關鍵節點（LRRK2激酶活性），實現從酶活性到細胞存活的全方位保護。相較于僅針對溶酶體的傳統療法，該策略為合并GBA1突變的PD患者提供了更全面的疾病修飾治療方案。目前DNL201等LRRK2抑制劑已進入III期臨床，本研究為其在GBA1相關PD亞群中的應用提供了強力的臨床前證據。