《npj Parkinson's Disease》：Differential memory enrichment of cytotoxic CD4 T cells in Parkinson’s disease patients reactive to α-synuclein
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帕金森�。≒D）病因復雜，神經炎癥作用關鍵。研究人員針對 PD 患者中對 α- 突觸核蛋白（α-syn）反應的 CD4 T 細胞展開研究，發現 PD_R 患者 CD4 效應記憶 T 細胞（TEM）中 CELSR2 表達升高，且 Granulysin+CD4 細胞毒性 TEM細胞減少，為 PD 病理研究提供新方向。
帕金森�。≒arkinson’s disease, PD）是一種復雜的神經退行性疾病，全球約有 1000 萬患者，且發病率隨年齡增長而升高。其核心病理特征是黑質致密部多巴胺能神經元丟失和 α- 突觸核蛋白（α-synuclein, α-syn）異常聚集形成的路易小體。除了運動癥狀如震顫、僵直和姿勢不穩外，非運動癥狀如睡眠障礙、認知功能障礙等可能在確診前 20 年就已出現。然而，由于 PD 的復雜性和異質性，早期診斷手段有限，治療方法也僅能緩解癥狀，無法阻斷疾病進展。深入理解 PD 的病理機制，尤其是免疫炎癥在其中的作用，成為開發靶向治療的關鍵。
在這樣的背景下，美國拉霍亞免疫學研究所（La Jolla Institute for Immunology）等機構的研究人員開展了相關研究，旨在揭示對 α-syn 反應的 PD 患者（PD_R）中 T 細胞亞群的異常變化。研究發現，PD_R 患者的 CD4 效應記憶 T 細胞（effector memory T cells, TEM）中 Cadherin EGF LAG 七 - pass G-type 受體 2（CELSR2）表達顯著升高，且細胞毒性 TEM細胞幾乎完全缺失，尤其是 Granulysin+CD4 細胞毒性 TEM細胞數量減少。該研究成果發表在《npj Parkinson's Disease》，為 PD 的免疫病理機制提供了新見解，并為靶向治療奠定了基礎。
研究人員主要采用了以下關鍵技術方法：
- 流式細胞術（Flow cytometry）：檢測 PD_R 和健康對照（HC_NR）中 CD4 T 細胞表面 CELSR2 的表達，以及 Granulysin+等細胞毒性標志物的水平。
- 單細胞 RNA 測序（Single-cell RNA sequencing, scRNA-seq）：對分選的 CELSR2+和 CELSR2- CD4 TEM細胞進行轉錄組分析，鑒定不同細胞亞群的基因表達特征。
- 樣本隊列：納入 PD 患者（分為對 α-syn 反應的 PD_R 和無反應的 PD_NR）和健康對照，通過外周血單個核細胞（PBMC）分析 T 細胞表型和功能。
研究結果
1. CELSR2 在 PD_R 患者 CD4 TEM細胞中表達升高
通過對 PD_R 和 HC_NR 的 CD4 記憶 T 細胞轉錄組分析，篩選出 11 個差異表達的膜蛋白基因，其中 CELSR2 在 PD_R 的 CD4 TEM細胞中蛋白表達顯著高于 HC_NR。進一步分析顯示，CELSR2 主要富集于效應記憶 T 細胞亞群（TEM），而非中央記憶 T 細胞（TCM）或終末分化效應記憶 T 細胞（TEMRA）。這提示 CELSR2 可能與 PD_R 患者 T 細胞的活化和分化狀態相關。
2. 單細胞轉錄組揭示 PD_R 患者 TEM細胞亞群分布異常
單細胞 RNA 測序分析顯示，PD_R 患者的 CELSR2+ CD4 TEM細胞中，分化型 TEM細胞（Cluster 1）和活化型 TEM細胞（Cluster 6）比例顯著增加，而細胞毒性 TEM細胞（Cluster 4，高表達 GZMB、GNLY 等細胞毒性基因）在 PD_R 患者中幾乎完全缺失，無論是 CELSR2+還是 CELSR2-亞群，其頻率均顯著低于 HC_NR。
3. 流式細胞術驗證 Granulysin+細胞毒性 CD4 TEM細胞減少
利用流式細胞術檢測 Granzyme B、Perforin 和 Granulysin 等細胞毒性標志物，發現 PD_R 患者中 Granulysin+ CD4 TEM細胞頻率顯著低于 HC_NR，而 CD8 T 細胞中的細胞毒性亞群無明顯差異。這表明 PD_R 患者的 CD4 T 細胞毒性功能特異性受損，可能與神經炎癥的調控異常相關。
研究結論與討論
本研究首次發現 CELSR2 在 T 細胞中的表達，并證實其在 PD_R 患者的 CD4 TEM細胞中富集。結合單細胞轉錄組和流式細胞術結果，揭示了 PD_R 患者中細胞毒性 CD4 TEM細胞的特異性缺失，尤其是 Granulysin+亞群的減少。這一發現提示，細胞毒性 CD4 T 細胞可能在 PD 的神經炎癥和神經元損傷中起保護作用，其缺失可能導致 PD_R 患者的病理進展。
CELSR2 作為一種非典型鈣粘蛋白，參與平面細胞極性和胚胎發育，其在 T 細胞中的功能此前未被報道。研究推測，CELSR2 可能通過調控 T 細胞的活化和分化，影響 PD 的免疫病理過程。此外，PD_R 患者中分化型和活化型 TEM細胞的增加，可能與抗原呈遞細胞的相互作用增強有關，進一步加劇神經炎癥。
盡管研究存在樣本量較小、女性患者比例低等局限性，但其首次明確了 α-syn 反應性 PD 患者中 T 細胞亞群的特異性變化，為 PD 的分型和免疫治療提供了新靶點。未來研究可進一步驗證 CELSR2 在 T 細胞中的功能機制，并探索 Granulysin+ CD4 T 細胞在神經保護中的作用，為開發針對 PD_R 患者的個性化免疫療法奠定基礎。
