在口腔頜面外科領域，牙源性角化囊腫(Odontogenic keratocyst, OKC)因其侵襲性生長特性備受關注。這種約占所有牙源性囊腫10%的病變，雖然惡變為癌性牙源性角化囊腫(Cancerous odontogenic keratocyst, COKC)的概率僅0.55%，但一旦發生則預后極差。更棘手的是，臨床醫生面臨三大困境：缺乏預測惡變的分子標志物、對神經侵襲特性認識不足、對為何罕見淋巴結轉移的機制不明。這些知識空白嚴重制約著臨床決策的精準性，使得這個本已罕見的疾病更添診治難度。

為破解這些難題，四川大學華西口腔醫院的研究團隊開展了一項創新性研究。他們采用單細胞RNA測序(scRNA-seq)技術，對3例COKC臨床樣本進行高精度解析，并整合公共數據庫中的OKC數據，構建了包含22,509個細胞的轉錄圖譜。相關成果發表在《Computational and Structural Biotechnology Journal》，首次系統揭示了COKC的分子特征和臨床特殊性。

研究采用的核心技術包括：單細胞轉錄組測序(10x Genomics平臺)、Harmony算法批次校正、CytoTRACE干細胞特性分析、inferCNV拷貝數變異檢測、CellChat細胞互作網絡分析，以及76例口腔鱗癌組織芯片驗證。臨床數據來源于該院2014-2024年間13例COKC和277例OKC患者的回顧性隊列。

3.1 COKC微環境的單細胞圖譜
通過UMAP降維分析，研究團隊成功鑒定出10種主要細胞類型。與OKC相比，COKC表現出顯著的細胞組成差異：上皮細胞中KRT14⁺基底細胞占比最高，且特異性存在Basal-C0-EXT1和Basal-C3-HIST1H3B兩個亞群。細胞互作分析發現，18條信號通路(如MIF、VISFATIN)在COKC中異�；钴S，其中成纖維細胞-基底細胞的相互作用尤為突出。

3.2 腫瘤細胞的轉錄異質性
上皮細胞重聚類揭示COKC特有的惡性演化軌跡：C0亞群(高表達EXT1)顯示最強侵襲性，C3亞群(高表達HIST1H3B)具有最高干細胞特性(CytoTRACE評分0.82)。代謝分析顯示C1亞群呈現獨特的脂肪酸代謝亢進，而C2亞群(SBSN⁺)可能是角質形成細胞前體。

3.3 拷貝數變異與轉錄調控
CNV分析顯示COKC上皮細胞存在Chr3p增益等共同變異。轉錄因子網絡揭示E2F7在C3亞群特異性激活，驅動細胞周期相關基因表達。生存分析證實，C3特征基因與頭頸鱗癌(TCGA-HNSC)患者不良預后顯著相關。

3.5 成纖維細胞表型轉換
4,205個成纖維細胞被分為三型：炎癥相關成纖維細胞(IFBs-ID2)、肌成纖維細胞1型(MFBs-1-APOD)和2型(MFBs-2-MALAT1)。COKC中發生明顯的IFB向MFB轉化，伴隨S100A蛋白家族上調和ETS1/2轉錄因子激活。蛋白互作網絡顯示MFBs-2通過MAPK/PI3K通路促進腫瘤侵襲。

3.7 顯著神經侵襲特性
臨床數據分析發現84.6%的COKC患者出現病灶區疼痛，顯著高于OKC組(P<0.001)。影像學和免疫組化證實腫瘤沿神經通道侵襲。單細胞數據揭示NRG1-ERBB4是介導腫瘤-神經交互的關鍵配體-受體對，其中C0亞群NRG1表達量最高。

3.8 低淋巴結轉移潛能
整合6例OSCC單細胞數據比較發現，COKC具有三大特征：更活躍的T細胞浸潤、EMT活性降低(Vimentin下調)、VEGFC表達減少。特別發現微管相關絲氨酸/蘇氨酸激酶4(MAST4)在COKC中高表達，其與OSCC患者較低N分期相關(IHC驗證P<0.05)。

這項研究首次從單細胞層面解析了OKC惡性轉化的分子圖譜，具有三重重要意義：首先，鑒定出Basal-C0-EXT1和Basal-C3-HIST1H3B作為潛在診斷標志物，特別是C3亞群通過E2F通路維持干細胞特性的發現，為靶向治療提供新思路；其次，臨床-分子聯合分析確立了疼痛作為惡變預警信號的價值，并闡明NRG1-ERBB4軸介導的神經侵襲機制，指導手術中神經處理的精準決策；最后，發現MAST4可能通過抑制EMT和淋巴管生成導致低轉移特性，挑戰了傳統頸清術式的必要性。

研究也存在三方面局限：樣本量受疾病罕見性限制、缺乏功能驗證模型、回顧性臨床數據的潛在偏倚。未來需要建立類器官模型深入驗證MAST4機制，并通過多中心研究完善臨床診療規范。這些發現不僅為COKC精準診療奠定基礎，也為理解其他囊性病變惡變提供了范式。