神經元分化是神經發育和再生醫學的核心問題，但調控這一過程的分子機制尚未完全闡明。盡管已知Wnt和MAPK信號通路參與神經發生，但miRNA如何通過靶向關鍵基因影響這些通路仍存在研究空白。尤其是一些新型miRNA如miR-937-3p、miR-4536-3p和miR-4650-5p，此前未被報道與神經元分化相關。

為解決這一問題，全南大學醫學院的研究團隊通過抑制上述miRNA，發現其可靶向調控Netrin1（NTN1）、Drebrin1（DBN1）和Netrin-G1（NTNG1）的表達，進而激活非經典Wnt/MAPK信號通路，促進SH-SY5Y細胞向神經元分化。研究采用qPCR驗證靶基因表達，雙熒光素酶報告實驗確認miRNA與靶基因3'-UTR結合，免疫熒光染色和Western blot分析神經元標志物及通路蛋白表達變化。

研究結果

1. miRNA與神經元分化及Wnt/MAPK通路的關聯
   生物信息學分析顯示，miR-937-3p、miR-4536-3p和miR-4650-5p與軸突導向、突觸形成及MAPK通路顯著相關，提示其在神經發育中的潛在作用。

2. miRNA靶向神經元相關基因的驗證
   通過TargetScan預測和實驗驗證，NTN1、DBN1和NTNG1分別被確認為miR-937-3p、miR-4536-3p和miR-4650-5p的直接靶標。抑制這些miRNA可顯著上調靶基因mRNA水平（如NTN1表達增加2.5倍），而 mimics則抑制靶基因翻譯。

3. miRNA抑制劑促進神經元標志物表達
   低濃度（1 pM）miRNA抑制劑處理SH-SY5Y細胞后，神經元特異性標志物TUBB3、NEFH和MAP2的mRNA和蛋白表達均顯著升高（MAP2陽性細胞占比達77.68%），且神經突長度和分支數明顯增加。

4. 非經典Wnt/MAPK通路的激活
   抗體芯片和Western blot顯示，miRNA抑制劑處理組中Wnt5a、p-JNK和c-Jun等非經典Wnt/MAPK通路蛋白表達上調，而經典Wnt信號分子（如Wnt1）無變化，表明分化依賴JNK和ERK信號激活。

結論與意義
該研究首次揭示miR-937-3p、miR-4536-3p和miR-4650-5p通過靶向NTN1/DBN1/NTNG1抑制神經元分化，其抑制劑可通過激活Wnt5a/MAPK軸促進神經突生長和標志物表達。這一發現不僅填補了miRNA調控神經分化的機制空白，還為阿爾茨海默病等神經退行性疾病的治療提供了潛在干預靶點。例如，DBN1在AD模型中的表達恢復可改善認知功能，提示miR-4536-3p抑制劑或具臨床轉化價值。未來研究可進一步探索這些miRNA在動物模型中的神經保護作用。