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mRNA疫苗研究解決方案

“疫苗”無疑是新冠疫情時期的熱詞之一。第三代疫苗技術中的mRNA疫苗正在迎接屬于它的時代。

將體外轉錄的mRNA注射到動物體內的研究早在90年代已有報道。注射到小鼠骨骼肌中的mRNA成功表達出蛋白質。隨后持續不斷地研究投入,為mRNA藥理學帶來了更多優化技術支撐。如今我們已經可以在體外合成更穩定、翻譯效率更高的mRNA,具備了行之有效的遞送技術。mRNA在疫苗研究以及其他治療領域的應用將得到更加深入的探索與研究。

Takara mRNA疫苗研究解決方案為mRNA疫苗研究提供多種實驗工具,應對體外合成、轉染與表達檢測等不同研究階段需求。

Takara mRNA疫苗研究解決方案
mRNA體外合成

生產mRNA主要通過體外合成方式進行,體系中RNA聚合酶以DNA為模板體外轉錄得到mRNA。Takara提供多種mRNA合成工具酶及相關試劑。

貨號 產品名稱 規格
2540A T7 RNA Polymerase 5,000 U
2520A SP6 RNA Polymerase 3,000 U
2181 Poly(A) Polymerase 20 U
2270A Recombinant DNase I (RNase-free) 1,000 U
2313A Recombinant RNase Inhibitor 5,000 U

※通過
“Takara?Bio中國官網”查看解決方案完整內容,了解限制性內切酶、核糖核苷酸等產品信息

mRNA轉染


進行動物實驗前,將mRNA轉染細胞是初步驗證所合成的mRNA是否有效的方法之一。Takara Xfect RNA轉染試劑可以高效轉染多種類型RNA至哺乳動物細胞,是包含轉染所需全部試劑的完整系統。

貨號 產品名稱 規格
631450 Xfect RNA Transfection Reagent 1.2 ml

Xfect是可生物降解的納米顆粒高分子聚合物轉染試劑,可提供更低的細胞毒性和高轉染效率,適用于廣泛的細胞類型,保證高轉染效率的同時保持了更高的細胞活性。

實驗例

1. HeLa細胞與間充質干細胞(MSCs)轉染GFP mRNA。HeLa細胞(2.0×105)和間充質干細胞(6.0×104)使用1 μg GFP mRNA和5 μl Xfect RNA轉染試劑進行處理。20小時后,通過落射熒光顯微鏡進行觀察。HeLa細胞圖像20倍放大,間充質干細胞圖像40倍放大。

Western Blot蛋白表達檢測

Western Blot分析仍然是目前實驗室常用的檢測分析方法之一,廣泛應用于對目標蛋白質的檢測與分析。轉染細胞后的mRNA會獲得怎樣的表達情況,通過Western Blot檢測可以獲得一目了然的結果。

Takara提供豐富的Western Blot實驗相關試劑,搭配詳細的實驗操作指南,提高Western Blot實驗效率。

化學發光檢出用
HPR底物

貨號 產品名稱 規格
T7101A Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate 250 ml
T7102A Western BLoT Quant HRP Substrate 100 ml

抗原
-抗體反應促進

貨號 產品名稱 規格
T7111A Western BLoT Immuno Booster 250 ml each
T7115A Western BLoT Immuno Booster PF 250 ml

HPR
標識二抗替代

貨號 產品名稱 規格
T7122A Western BLoT Rapid Detect v2.0 50 Rxns

封閉與洗脫


貨號 產品名稱 規格
T7131A Western BLoT Blocking Buffer(Fish Gelatin) 1 L
T7132A Western BLoT Blocking Buffer(Protein Free) 500 ml
T7135A Western BLoT Stripping Buffer 500 ml

電泳緩沖液方便裝與蛋白質
Marker

貨號 產品名稱 規格
T9101 Tris-Glycine-SDS Buffer (TG-SDS) Powder, pH8.3 10 pouches(for 10 L)
T9102 Tris-Glycine Buffer (TG) Powder, pH8.3 10 pouches(for 10 L)
3453A CLEARLY Protein Ladder (Unstained) 500 μl
3454A CLEARLY Stained Protein Ladder 500 μl
T9320A TaKaRa CBB Protein Safe Stain 1 L

Western Blot實驗操作指南》,歡迎下載閱讀。

 

病毒RNA檢測
動物實驗是檢驗疫苗效果的重要一環。這其中少不了對不同實驗組別動物體內病毒載量的檢測。除了經典的組織病理學、免疫組化方法外,快速、靈敏的熒光定量PCR方法同樣不可少。Takara提供高質量的病毒核酸檢測相關產品,加速研究進程。

探針法一步
RT-PCR試劑與病毒核酸提取

貨號 產品名稱 規格
RR064A One Step PrimeScript? RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 100 Rxns
RR600A One Step PrimeScript? III RT-qPCR Mix 200 Rxns
9766 TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0 50 Rxns

【文獻案例】
  • Huang, Qingrui, et al.?“A Single-Dose mRNA Vaccine Provides a Long-Term Protection for HACE2 Transgenic Mice from SARS-CoV-2.” Nature Communications, vol. 12, no. 1, 2021, pp. 776–776.
  • Zhang, Na Na, et al.?“A Thermostable mRNA Vaccine Against COVID-19.” Cell, vol. 182, no. 5, 2020, pp. 1271–1283.
疫苗的研發是一場與病毒的賽跑。mRNA疫苗也隨著不斷開展的相關研究穩步向前,Takara疫苗研究方案為廣大疫苗研究團隊提供更多選擇。點擊下方專題,了解更多基因工程疫苗研究解決方案。
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參考文獻
  • Wolff, Jon A., et al.?“Direct Gene Transfer into Mouse Muscle in Vivo.” Science, vol. 247, no. 4949, 1990, pp. 1465–1468.
  • Pardi, Norbert, et al.?“mRNA Vaccines — a New Era in Vaccinology.” Nature Reviews Drug Discovery, vol. 17, no. 4, 2018, pp. 261–279.

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