mRNA疫苗研究解決方案
“疫苗”無疑是新冠疫情時期的熱詞之一。第三代疫苗技術中的mRNA疫苗正在迎接屬于它的時代。
將體外轉錄的mRNA注射到動物體內的研究早在90年代已有報道。注射到小鼠骨骼肌中的mRNA成功表達出蛋白質。隨后持續不斷地研究投入，為mRNA藥理學帶來了更多優化技術支撐。如今我們已經可以在體外合成更穩定、翻譯效率更高的mRNA，具備了行之有效的遞送技術。mRNA在疫苗研究以及其他治療領域的應用將得到更加深入的探索與研究。
Takara mRNA疫苗研究解決方案為mRNA疫苗研究提供多種實驗工具，應對體外合成、轉染與表達檢測等不同研究階段需求。
Takara mRNA疫苗研究解決方案
mRNA體外合成
生產mRNA主要通過體外合成方式進行，體系中RNA聚合酶以DNA為模板體外轉錄得到mRNA。Takara提供多種mRNA合成工具酶及相關試劑。
| 貨號 |
產品名稱 |
規格 |
| 2540A |
T7 RNA Polymerase |
5,000 U |
| 2520A |
SP6 RNA Polymerase |
3,000 U |
| 2181 |
Poly(A) Polymerase |
20 U |
| 2270A |
Recombinant DNase I (RNase-free) |
1,000 U |
| 2313A |
Recombinant RNase Inhibitor |
5,000 U |
※通過“Takara?Bio中國官網”查看解決方案完整內容，了解限制性內切酶、核糖核苷酸等產品信息
mRNA轉染
進行動物實驗前，將mRNA轉染細胞是初步驗證所合成的mRNA是否有效的方法之一。Takara Xfect RNA轉染試劑可以高效轉染多種類型RNA至哺乳動物細胞，是包含轉染所需全部試劑的完整系統。
| 貨號 |
產品名稱 |
規格 |
| 631450 |
Xfect RNA Transfection Reagent |
1.2 ml |
Xfect是可生物降解的納米顆粒高分子聚合物轉染試劑，可提供更低的細胞毒性和高轉染效率，適用于廣泛的細胞類型，保證高轉染效率的同時保持了更高的細胞活性。
實驗例
圖1. HeLa細胞與間充質干細胞（MSCs）轉染GFP mRNA。HeLa細胞（2.0×105）和間充質干細胞（6.0×104）使用1 μg GFP mRNA和5 μl Xfect RNA轉染試劑進行處理。20小時后，通過落射熒光顯微鏡進行觀察。HeLa細胞圖像20倍放大，間充質干細胞圖像40倍放大。
Western Blot蛋白表達檢測
Western Blot分析仍然是目前實驗室常用的檢測分析方法之一，廣泛應用于對目標蛋白質的檢測與分析。轉染細胞后的mRNA會獲得怎樣的表達情況，通過Western Blot檢測可以獲得一目了然的結果。
Takara提供豐富的Western Blot實驗相關試劑，搭配詳細的實驗操作指南，提高Western Blot實驗效率。
化學發光檢出用HPR底物
| 貨號 |
產品名稱 |
規格 |
| T7101A |
Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate |
250 ml |
| T7102A |
Western BLoT Quant HRP Substrate |
100 ml |
抗原-抗體反應促進
| 貨號 |
產品名稱 |
規格 |
| T7111A |
Western BLoT Immuno Booster |
250 ml each |
| T7115A |
Western BLoT Immuno Booster PF |
250 ml |
HPR標識二抗替代
| 貨號 |
產品名稱 |
規格 |
| T7122A |
Western BLoT Rapid Detect v2.0 |
50 Rxns |
封閉與洗脫
| 貨號 |
產品名稱 |
規格 |
| T7131A |
Western BLoT Blocking Buffer（Fish Gelatin） |
1 L |
| T7132A |
Western BLoT Blocking Buffer（Protein Free） |
500 ml |
| T7135A |
Western BLoT Stripping Buffer |
500 ml |
電泳緩沖液方便裝與蛋白質Marker
| 貨號 |
產品名稱 |
規格 |
| T9101 |
Tris-Glycine-SDS Buffer (TG-SDS) Powder, pH8.3 |
10 pouches（for 10 L） |
| T9102 |
Tris-Glycine Buffer (TG) Powder, pH8.3 |
10 pouches（for 10 L） |
| 3453A |
CLEARLY Protein Ladder (Unstained) |
500 μl |
| 3454A |
CLEARLY Stained Protein Ladder |
500 μl |
| T9320A |
TaKaRa CBB Protein Safe Stain |
1 L |
《Western Blot實驗操作指南》，歡迎下載閱讀。
病毒RNA檢測
動物實驗是檢驗疫苗效果的重要一環。這其中少不了對不同實驗組別動物體內病毒載量的檢測。除了經典的組織病理學、免疫組化方法外，快速、靈敏的熒光定量PCR方法同樣不可少。Takara提供高質量的病毒核酸檢測相關產品，加速研究進程。
探針法一步RT-PCR試劑與病毒核酸提取
| 貨號 |
產品名稱 |
規格 |
| RR064A |
One Step PrimeScript? RT-PCR Kit (Perfect Real Time) |
100 Rxns |
| RR600A |
One Step PrimeScript? III RT-qPCR Mix |
200 Rxns |
| 9766 |
TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0 |
50 Rxns |
【文獻案例】
- Huang, Qingrui, et al.?“A Single-Dose mRNA Vaccine Provides a Long-Term Protection for HACE2 Transgenic Mice from SARS-CoV-2.” Nature Communications, vol. 12, no. 1, 2021, pp. 776–776.
- Zhang, Na Na, et al.?“A Thermostable mRNA Vaccine Against COVID-19.” Cell, vol. 182, no. 5, 2020, pp. 1271–1283.
疫苗的研發是一場與病毒的賽跑。mRNA疫苗也隨著不斷開展的相關研究穩步向前，Takara疫苗研究方案為廣大疫苗研究團隊提供更多選擇。點擊下方專題，了解更多基因工程疫苗研究解決方案。
《重組腺病毒疫苗研究解決方案》
《重組蛋白疫苗研究解決方案》
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參考文獻
- Wolff, Jon A., et al.?“Direct Gene Transfer into Mouse Muscle in Vivo.” Science, vol. 247, no. 4949, 1990, pp. 1465–1468.
- Pardi, Norbert, et al.?“mRNA Vaccines — a New Era in Vaccinology.” Nature Reviews Drug Discovery, vol. 17, no. 4, 2018, pp. 261–279.
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